image/svg+xml A. Une protéine cytotoxique est purifiéeà partir de corps parasporaux de Bacillus thuringiensis A1100 et après maturation par protéolyse ménagée à la protéinase K.La piste 2 de l'analyse SDS-PAGE ci-dessus montre la pureté de la préparation et permet d'évaluer la masse moléculaire de la protéine : vers 30 kDa.Piste 1 = marqueur de taille. . A Adapté de Ekino K, Okumura S, Ishikawa T, et al. Cloning and characterization of a unique cytotoxic protein parasporin-5 produced by Bacillus thuringiensis A1100 strain. Toxins (Basel). 2014;6(6):1882–1895. B. On réalise alors une analyse par "MALDI-TOF mass spectrometry" de la protéine purifiée (M). B Abscisse : les ratios masse-charge des molécules-ions détectés.Ordonnée : intensité du signal en index arbitraire. Selon le pic [M+H]+ à 29771.96, on aurait une protéine (M) de masse moléculaire :29772-1 = 29771 Da puisque z=1 pour [M+H]+Le pic [M+2H]2+ conduit lui à 14874,5*2-2 = 29747 Da puisque z=2 et 2 protons dans la molécule-ion.On retiendra une masse moléculaire vers 29,75 kDa pour la protéine (cf. écart sur les calculs). suivant Retour Départ Fin Pic de la molécule-ion majoritaire formée par la source d'ionisation MALDI :[M+H]+ Pic de molécule-ion moins fréquente :[M+2H]2+
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