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On suppose qu'on utilise un détecteur en continu en sortie de séparation chromatographique. On suppose que le détecteur fournit à chaque instant un signal mesuré M qui est proportionnel à la concentration de l'espèce moléculaire X détecté selon un coefficient de réponse rx.
C'est à dire qu'on suppose qu'à chaque instant [X] = rx * M
(où [X] = concentration en X éluant à l'instant t et mesurée le détecteur).
Les détections par mesure d'absorbance, conductimétrie, fluorimétrie ... pour l'HPLC sont de ce type. Les détecteurs catharomètres, à ionisation de flamme ... pour la CPG sont de ce type.

Il s'agit de montrer que dans ces conditions la surface du pic d'élution de X (Sx) est proportionnelle à la quantité de matière totale X (nx) qui a été éluée dans le pic. on suppose que X est parfaitement isolé à l'élution.

La figure à droite va être utilisée pour la démonstration :

- t représente la durée. X est éluée entre les temps ti et tf ;

- soit [X] la concentration en X détectée à l'instant t et qui répond donc à la relation [X] = rx * M (avec M signal mesuré au temps t)

- soit δnx la quantité de X qui élue durant un petit intervalle de temps δt centré autour du temps t. Soit δv le volume élué correspondant à la durée δt. pour lequel la valeur de signal détecté est M.

On a les relations :

δv = D * δt     où D désigne le débit de la phase mobile supposé constant

et    δnx # [X] * δv    soit    δnx # rx * M * δv

relations qui se combinent en :

δnx # rx * M * D * δt

pic


Si on fait tendre δt vers zéro, on peut utiliser une écriture différentielle et une relation d'égalité vraie, à savoir :

dnx = rx * M * D * dt     (1)

Soit nx la quantité totale de X éluée dans le pic donc entre les temps ti et tf, on a nx = ti à tf dnx
Soit en reprenant   (1):

nx = ti à tf rx * M * D * dt

Soit :

nx = rx * D * ti à tf M * dt     (2)

Soit, puisque    ti à tf M * dt n'est autre que la surface (Sx)du pic d'élution de X :

nx est proportionnel à Sx  (cqfd)

Le facteur de proportionalité (en fait rx * D ) est déterminé expérimentalement lors des étalonnages.

Page (surface pic de X) = k * (qté de X) - JF Perrin - jef.perrin.free.fr - novembre 2002