Modes de séparation en chromatographie liquide analytique

1. Modes de séparation

On ne s'intéresse ici qu'à des applications analytiques des chromatographies liquides sur colonne (LC, liquid chromatography). La nomenclature des modes de séparation n'est malheureusement pas très stricte. Les séparations chromatographiques exploitent pour l'essentiel 3 grands types de caractéristiques qui différencient les analytes : des différences de polarité, de charge électriques ou de taille. Le chapitre sera donc construit selon ces 3 modes de séparation mis en relation avec les phases stationnaires alors utilisées et enfin les phases mobiles et les modes d'élution pertinents.

Note. Dans ce qui suit, j'ai essayé de suivre en français, et sans trop de franglais, le vocabulaire issues du vocabulaire anglais de l'IUPAC (https://goldbook.iupac.org/html/C/C01075.html).

Séparations selon la polarité des analytes
- Chromatographies liquides avec phase stationnaire polaire : adsorbant polaire ou phase greffée polaire. On parle généralement de phase "normale" (normal phase). Dans cette catégorie on rangera les LC dites HILIC (hydrophilic interaction liquid chromatography)
- Chromatographies liquides avec phase stationnaire apolaires : en pratique les phases greffées apolaires. La plus classique est la phase greffée avec le motif fluide en C18. On parle de phase inversée (reverse phase).
Séparations selon la densité de charge électrique : chromatographies liquides d'échange d'ions
Séparations selon la taille : Chromatographies de gel perméation, dites aussi d'exclusion stérique, dites aussi d'exclusion diffusion

Note. Les séparations d'énantiomères (chromatographie chirale, énantiosélective) ne seront pas abordées. Voir par exemple https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Supelco/Posters/t408109h.pdf pour ceux que ça intéresse. La chromatographie d'affinité qui met en oeuvre l'adsorption biospécifique entre un ligand et un "récepteur" ne sera pas non plus abordée, il s'agit d'un mode chromatographique dédié à la purification de molécules biologiques. Voir par exemple http://perrin33.com/purifprot/purification_2.php.

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