Retours vers :
[Accueil]
[Sommaire du dossier]
JF Perrin mise à jour 2003/2020
[A propos de l'auteur]
[Droits de copie]
Retours vers :
[Accueil]
[Sommaire du dossier]
JF Perrin mise à jour 2003/2020
[A propos de l'auteur]
[Droits de copie]
Les protéines sont des composés amphotères en raison des fonctions acides/bases qu'elles portent : -COOH/-COO- du carbone terminal, des glutamates, des aspartates, -NH2/-NH3+ de l'azote terminal et des lysines, =N-/=NH+- des histidines, N-C(=NH)-N / N-C(=NH2+)-N des arginines ...D'où le schéma fondamental :
 |
pHi (noté souvent pi) = point isoélectrique = pH pour lequel la charge nette d'une protéine donnée est nulle . pour pH<pHi la charge nette est positive (de plus en plus) ; pour pH>pHi, elle est négative (de plus en plus). (la valeur du pHi est influencée par la force ionique du milieu et par l'état conformationnel natif ou dénaturé. En effet les pK des couples acide/base varient en fonction de la force ionique et de l'environnement des groupements très immédiats) |
Si on place une protéine P, de pH isoélectrique pHi dans un système proposant un gradient linéaire de pH et plongeant dans un réservoir acide côté pH acide du gradient et alcalin côté pH alcalin du gradient et soumis à un champ électrique avec borne positive côté réservoir acide et borne négative côté réservoir alcalin, alors la protéine P est focalisée à son lieu de pHi.
Si on place un mélange de protéines de pH isoélectriques différents dans un système proposant un gradient linéaire de pH selon le montage vu ci-avant, on verra chacune focaliser sur son point de pHi. Les isoélectrofocalisations (IEF) sont des électrophorèses à l'équilibre (au contraire des électrophorèse de zone).
